مطالعه کروموزومی روی خون محیطی

Transcript

1 مطالعه کروموزومی روی خون محیطی آزمایشگاه تخصصی و فوق تخصصی دکتر آیت الل هی Chromosomal Study On Peripheral Blood شرح تست: بیماریهای کروموزومی یکی از انواع بزرگ بیماریهای ژنتیکی را تشکیل میدهد. اختالالت کرومووزومی در جمعیتهای مختلف نسبتا شایع میباشد. از نظر بالینی اختالالت کروموزومی با نسبت باالیی در مووارد زیور وجوود دارد: سقطهای خودبخودی افراد با ناهنجاریهای شکلی مادرزادی عقب افتادگی ذهنی عقیمی خوان هوا بوا دیو گنوادی و زوجین با سقطهای تکراری. در موارد فوق مطالعه کروموزومی و سیتوژنتیک غیرقابل اجتناب است و باید انجام گردد. نمونه مورد نیاز: 2cc خون سیاهرگی با سرنگ استریل محتوی هپارین که میتوان آن را در آزمایشگاه نمونهگیری کرد یا بالفاصله به آزمایشگاه و در دمای اتاق ارسال گردد.. 1 کشت روتین 27 ساعته با PHA در دو ظرف مجزا 7 هاروست سلولی و تهیه حداقل 6 الم میکروسکوپی 3 باندینگ و رنگ آمیزی 4 مطالعه سلولها و آنالیز آنها 5 عکسبرداری و تهیه کاریوتایپ روش انجام آزمایش: حساسیت روش مورد آزمایش: براساس کیفیت باندینگ برای بررسی ساختار کروموزومها آنالیز صورت میگیرد. مدارک مورد نیاز: اطالعات بالینی و مدارک پزشکی بیمار و نوع داروهای مصرفی و بررسی علت مراجعه موارد برگشت نمونه: نمونه یخ زده لخته نمونه همولیز یا وجود آلودگیهایی داخل نمونوه گورفتن نمونوه در لولوههوای مدت زمان الزم جهت پاسخگویی: یک ماه نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک بررسی تفسیر و گزارش میشود پذیرش کشت لنفوسیتهای خون محیطی برای ناهنجاریهای کروموزومی بررسی 1515 سلول دو کاریوتایپ با روش نواری تفسیر و گزارش 95488

2 مطالعه کروموزومی با کیفیت باال High Resolution Chromosomal Study شرح تست: بیماریهای کروموزومی یکی از انواع بزرگ بیماریهای ژنتیکی را تشکیل میدهد. اختالالت کرومووزومی در جمعیتهای مختلف نسبتا شایع میباشد. از نظر بالینی اختالالت کروموزومی با نسبت باالیی در مووارد زیور وجوود دارد: سقطهای خودبخودی افراد با ناهنجاریهای شکلی مادرزادی عقب افتادگی ذهنی عقیمی خان ها با دی ژنزی گنوادی و زوجین با سقطهای تکراری. در موارد فوق مطالعه کروموزومی و سیتوژنتیک غیرقابل اجتناب است و باید انجام گردد. نمونه مورد نیاز: 2cc خون سیاهرگی با سرنگ استریل محتوی هپارین که میتوان آن را در آزمایشگاه نمونهگیری کرد یا بالفاصله به آزمایشگاه و در دمای اتاق ارسال گردد.. 1 کشت روتین 27 ساعته با PHA در دو ظرف مجزا 7 کشت با کیفیت باال 27 ساعته با اضافه کردن تایمیدین 3 هاروست سلولی و تهیه حداقل 6 الم میکروسکوپی 4 باندینگ و رنگ آمیزی 5 مطالعه سلولها و آنالیز آنها 6 عکسبرداری و تهیه کاریوتایپ روش انجام آزمایش: حساسیت روش مورد آزمایش: براساس کیفیت باندینگ برای بررسی ساختار کروموزومها آنالیز صورت میگیرد. مدارک مورد نیاز: اطالعات بالینی و مدارک پزشکی بیمار و نوع داروهای مصرفی و بررسی علت مراجعه موارد برگشت نمونه: نمونه یخ زده لخته نمونه همولیز یا وجود آلودگیهایی داخل نمونوه گورفتن نمونوه در لولوههوای مدت زمان الزم جهت پاسخگویی: یک ماه نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک بررسی تفسیر و گزارش میشود پذیرش کشت لنفوسیتهای خون محیطی برای ناهنجاریهای کروموزومی مطالعه با قدرت تفکیک باال تفسیر و گزارش 95488

3 مطالعه کروموزومی از نظر شکستگیهای کروموزومی )آنمی فانکونی( Chromosomal Study For chromosomal Breakage Syndrome (Fanconi Anemia) شرح تست: آنمی فانکونی (FA) با پان سیتوپنی و برخی ناهنجواریهوای موادرزادی و همینوین ناپایوداری کرومووزومی خودبه خودی و یا القاء شده مشخص میگردد. با استفاده از مواد کالسوتوژنیک نظیور میتومایسوین )MMC( C و یوا دی اپوکسی بوتان (DEB) بر لنفوسیتهای کشت داده شده میتوان ناپایداری کروموزومی که در جریان FA ایجاد میگردد را مشاهده نمود و آن را ازآنمیهای آپالستیک ایدیوپاتیک افتراق داد. نمونه مورد نیاز: 5cc خون سیاهرگی با سرنگ استریل محتوی هپارین که میتوان آن را در آزمایشگاه نمونهگیری کرد یا بالفاصله به آزمایشگاه و در دمای اتاق ارسال گردد. 1 کشت روتین 27 ساعته با (F) PHA 7 کشت 27 ساعته با اضافه کردن میتومایسین از ابتدای کشت 27 ساعته ( (FM 3 کشت کنترل از یک فرد نرمال 27 ساعته با PHA 4 هاروست و تهیه الم میکروسکوپی 5 رنگ آمیزی معمولی با گیمسا جهت بررسی شکنندگی کروموزومها 6 عکسبرداری از سلولها و تفسیر نتایج روش انجام آزمایش: مدارک مورد نیاز: اطالعات بالینی و مدارک پزشکی بیمار و نوع داروهای مصورفی و بررسوی CBC بیموار در 49 سواعت گذشته مورد نیاز است. موارد برگشت نمونه: نمونه یخ زده لخته نمونه همولیز یا وجود آلودگیهایی داخل نمونوه گورفتن نمونوه در لولوههوای مدت زمان الزم جهت پاسخگویی: 14 روز نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک بررسی تفسیر و گزارش میشود پذیرش بررسی کروموزومی برای سندرومهای شکنندگی کروموزوم شکنندگی کروموزومها )فانکونی( چهار کشت تفسیر و گزارش 95488

4 مطالعه کروموزومی از نظر موزائیسم آزمایشگاه تخصصی و فوق تخصصی دکتر آیت الل هی Chromosomal Study For Mosaicism شرح تست: بیماریهای کروموزومی یکی از انواع بزرگ بیماریهای ژنتیکی را تشکیل میدهد. اختالالت کرومووزومی در جمعیتهای مختلف نسبتا شایع میباشد. از نظر بالینی اختالالت کروموزومی با نسبت باالیی در مووارد زیور وجوود دارد: سقطهای خودبخودی افراد با ناهنجاریهای شکلی مادرزادی عقب افتادگی ذهنی عقیمی خان ها با دی ژنزی گنادی و زوجین با سقطهای تکراری. در موارد فوق مطالعه کروموزومی و سیتوژنتیک غیرقابل اجتناب است و باید انجام گردد. نمونه مورد نیاز: 2cc خون سیاهرگی با سرنگ استریل محتوی هپارین که میتوان آن را در آزمایشگاه نمونهگیری کرد یا بالفاصله به آزمایشگاه و در دمای اتاق ارسال گردد. 1 کشت روتین 27 ساعته با PHA در دو ظرف مجزا 7 هاروست سلولی و تهیه حداقل 6 الم میکروسکوپی 3 باندینگ و رنگ آمیزی 4 مطالعه 55 سلول از مجموع المها و آنالیز آنها 5 عکسبرداری و تهیه کاریوتایپ روش انجام آزمایش: حساسیت روش مورد آزمایش: براساس کیفیت باندینگ برای بررسی ساختار کروموزومها و شمارش آنها. مدارک مورد نیاز: اطالعات بالینی و مدارک پزشکی بیمار و نوع داروهای مصرفی و بررسی علت مراجعه موارد برگشت نمونه: نمونه یخ زده لخته نمونه همولیز یا وجود آلودگیهایی داخل نمونوه گورفتن نمونوه در لولوههوای مدت زمان الزم جهت پاسخگویی: یک ماه نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک بررسی تفسیر و گزارش میشود پذیرش کشت لنفوسیتهای خون محیطی برای ناهنجاریهای کروموزومی بررسی کلی 55 سلول برای موزائیس تفسیر و گزارش 95488

5 مطالعه کروموزومی روی سلولهای مغز استخوان Chromosomal Study On Bone Marrow شرح تست: گ ست ر ش عل سیت وژنتیک با عث گ ر د ی د ه توا جهوت ب ررسوی و درموان بیمواران مبوتال بوه انو واع بیمواریهوای هماتولوژی از کاریوتایپینگ آسپیره مغز استخوان به عنوان یک جزء تشخیصی مه استفاده گردد. تستهای سویتوژنتیک و از آن جمله مطالعه کروموزومی مغز استخوان در این حوزه برای تشخیص طبقه بندی بیماری تصمی با درمان پایش بیماری عود و یا بهبود استفاده میگردد. گیری در ارتبوا نمونه مورد نیاز: 35 cc آسپیراسیون مغزاستخوان یا 5 cc خون محیطی هپارینوه ( در صوورتیکه بویش از %15 میوزان بالست در خون محیطی موجود باشد( توسط همراه بیمار در اسرع وقت به آزمایشگاه و در دموای اتواق ارسوال گوردد. در صورت احتمال ابتال به انواع لوسمی قبل از شروع شیمی درمانی نمونهگیری باید انجام و ارسال گردد. روش انجام آزمایش: نمونه خون پ از تعیین میزان WBC Count به انودازه 15٧ سولول بوه محویط کشوت مخصوو مغزاستخوان اضافه میشود بسته به نوع متد به کار برده شده زمان نیاز است تا بالستها رشد کنند و وارد مرحله متافواز گردند بعد از گذشت زمان مورد نیاز )74 یا 49 یا یک شب( سلولها وارد مرحله بعدی آزمایش به نام هاروست) )Harvest میشوند و طی مراحل بعدی آزمایش از هر نمونه حداقل 6 الم میکروسکوپی گرفته میشود و باندینگ روی آنها انجوام و پ از عکسبرداری از مجموع المها و تهیه کاریوتایپ انالیز انجام میگردد. حساسیت روش مورد آزمایش: براساس کیفیت باندینگ برای بررسی اختالالت ساختاری وشمارشی کروموزومها مدارک مورد نیاز: اطالعات بالینی و مدارک پزشکی بیمار و اطالع از آخرین دوره شیمی درمانی و نوع داروهای مصورفی و تشخیص اولیه مورد نیاز است. موارد برگشت نمونه: نمونه یخ زده لخته نمونه همولیز یا وجود آلودگیهایی داخل نمونوه گورفتن نمونوه در لولوههوای نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک بررسی تفسیر و گزارش میشود. پذیرش کشت سلولهای مغز استخوان بررسی سیتوژنتیک مغزاستخوان تفسیر و گزارش 95488

6 مطالعه کروموزومی مایع آمنیوتیک آزمایشگاه تخصصی و فوق تخصصی دکتر آیت الل هی Chromosomal Study on Amniotic Fluid شرح تست: مایع آمنیوتیک مایعی است که اطراف جنین را فراگرفته است و باعث حفاظت از جنین در مقابول ضوربات و فشارها میگردد و همینین منبع اکسیژن پروتئین و سایر موادی است که جهت رشد جنین مورد نیاز میباشد. یک نمونه از این مایع جهت تست توسط تکنیک آمنیوسنتز و معموال بین هفته 1619 حاملگی ارسال میگردد. سلولهای جنینی از این مایع آمنیوتیک جهت بررسیهای کروموزومی استفاده میگردد. آنالیز کروموزومی مایع آمنیوتیک روندی است کوه در آن سلولهای جنینی برای هر گونه تغییرات بزرگ ساختمانی و یا تعدادی کروموزومها مورد بررسی قرار میگیرند. در روند آنالیز و کاریوتایپ مایع آمنیوتیک سلولهای جنینی موجود در مایع آمنیوتیک کشت داده میشوند و پ از رشد مراحول هاروست spreading و رنگ آمی زی انجام و ب راسوا س ح وو ور بانو دهای تیو ر ه و ر وشون م و جو و د بو ر وی کرومووزومها آنوالیز کروموزومی انجام میپذیرد. در صورتیکه نمونه دریافتی مربو به هفته 1377 هفتوه بوارداری باشد یررسوی میوزان آلفوا فتوپروتئین مایع آمنیوتیک نیز مفید خواهد بود. 1 مادران باردار با سن باالی 35 سال 7 تولد نوزاد زنده قبلی با ناهنجاریهای کروموزومی 3 مرده زایی قبلی که با احتمال اختالالت کروموزومی بوده است. 4 بازآرایی کروموزومی والدین موزائیس کروموزومی و یا آنوپلوئیدیهای کروموزومهای جنینی 5 نتایج مثبت غربالگری سرمی مادری مبنی بر افزایش خطر اختالالت کروموزومی جنین 6 نتایج سونوگرافی غیر نرمال جنین 2 خطر سندرومهای شکنندگی کروموزومی و یا سایر سندرومها با یافتههای سیتوژنتیک اختصاصی موارد کاربرد: نمونه مورد نیاز: 20cc از نمونه مایع آمنیوتیک بدون آلودگی به خون و در شرایط کامال اسوتریل و در داخول لولوههوای فالکون 50cc جهت انجام مطالعات سیتوژنتیک باید بالفاصله به آزمایشگاه و به دور از نورمستقی و در دموای اتواق ارسوال گردد. نام بیمار تاریخ تولد مادر سن حاملگی و تشخیص احتمالی حتما باید ذکر گردد. محدودیتهای انجام تست: 1 اختالالت کروموزومی جزئی با این تست قابل ارزیابی نیست و نیاز به تستهای تکمیلی بیشتری دارد. 7 در صورت آلوده شدن مایع آمنیوتیک به سلولهای مادری نتایج ممکن است اشوتباه گوردد و بیشوتر از آنکوه نمایوانگر مشخصات کروموزومی جنین باشد نمایانگر مشخصات کروموزومی مادر خواهد بود. 3 بعوی از جنینها ممکن است بیش از یک گونه آرایش کروموزومی در بدن باشند)موزائیس ) و نیازمند شمارش تعوداد بیشتری از متافازهای سلولهای آمنیوتیک خواهد بود. 4 تعداد زیادی از اختالالت ژنتیکی وجود دارد که آنقدر این تغییرات جزئی و خفیف در سط DNA مویباشود کوه بوه وسیله این تست قابل بررسی نمیباشد. 5 یک نتیجه نرمال بروی آنالیز کروموزومی مایع آمنیوتیک قطعا دلیل بر آن نیست که این بیه در صورت تولد هییگونه نقص ژنتیکی و یا اختالل تکاملی را در آینده نداشته باشد.

7 مدارک مورد نیاز: آخرین نتایج آزمایشگاهی )مارکرهای سرمی مادر( و سونوگرافیهای قبلی. موارد برگشت نمونه: مایع آمنیوتیک آغشته به خون حتی به مقدار ک و یا قهووه ای رنوگ موایع آمنیوتیوک کودر مایع آمینوتیک که بیش از 7 ساعت بعد از زمان نمونهگیری به آزمایشگاه برسد. مدت زمان الزم جهت پاسخگویی: در صورت ارسال نمونه با شرایط مناسب حدود 15 روز زمان مورد نیاز میباشد. نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک بررسی تفسیر و گزارش میشود. پذیرش کشت سلولهای مایع آمنیون بررسی 15 سلول مایع آمنیوتیک تفسیر و گزارش 95488

8 مطالعه کروموزومی از نظر سندرم ایکس شکننده Chromosomal Study for Detection of Fragile X Syndrome شرح تست: سندرم X شکننده یکی از رایجترین علل ارثی اختالالت یادگیری است. این مشکل در میان پسران شایعتور از دختران است و موجب طیف وسیعی از مشکالت یادگیری و رفتاری میگردد. سندرم X شکننده اختاللی ژنتیکی اسوت و عامل مسبب سندرم X شکننده افزایش تکرارهای سه تایی CGG در ژن FMR1 میباشد.این ژن کود کننوده پوروتئین FMRP میباشد که این پروتئین برای تکامل و یا عملکرد معمول مغز مورد نیاز میباشد. FMR1 نزدیک به انتهوای بوازوی بلند کروموزومX قرار دارد در بیمار مبتال به سندروم X شکننده پ از انجام کشت و کاریوتایپینگ در شرایط مخصو و بررسی با میکروسکوپ انتهای بازوی بلند کروموزوم X به شکل شکسته و آویزان مشهود میباشد. نمونه مورد نیاز: 2cc خون سیاهرگی با سرنگ استریل محتوی هپارین که میتوان آن را در آزمایشگاه نمونهگیری کرد یا بالفاصله به آزمایشگاه و در دمای اتاق ارسال گردد. 1 کشت روتین 27 ساعته با PHA 7 کشت 27 ساعته در محیط folate) (Low 3 کشت 86 ساعته با اضافه کردن تایمیدین 4 هاروست سلولی و تهیه حداقل 6 الم میکروسکوپی 5 باندینگ و رنگ آمیزی 6 مطالعه سالولها و آنالیز آنها 2 عکسبرداری و تهیه کاریوتایپ روش انجام آزمایش: حساسیت روش مورد آزمایش: براساس کیفیت باندینگ برای بررسی ساختار کروموزومها آنالیز صورت میگیرد. مدارک مورد نیاز: اطالعات بالینی و مدارک پزشکی بیمار و نوع داروهای مصرفی و بررسی علت مراجعه موارد برگشت نمونه: نمونه یخ زده لخته نمونه همولیز یا وجود آلودگیهایی داخل نمونوه گورفتن نمونوه در لولوههوای مدت زمان الزم جهت پاسخگویی: یک ماه نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک بررسی تفسیر و گزارش میشود پذیرش بررسی شکستگی کروموزوم FragX )چهار کشت( بررسی شکنندگی کروموزوم بررسی کلی 155 سلول تفسیر و گزارش 95488

9 ISH and CISH Studies بررسی اختالالت کروموزومی در MDS به روش FISH FISH for MDS: Del 5q,Del p53,del 7q,Del 20q شرح تست: بیماریها یا سندرمهای میلودی پالستیک( MDS ) اختالالتی هستند که در آنها آپوپتوز غلبوه دارد خوون سازی غیرموثر و جود دارد و سیتوپنیها رخ میدهد 5 اخوتالالت میلوو دیو پالسوتیک / میلوپرولیفراتیوو خصوصویاتی از هردو با افزایش سلولها و نیز دی پالزی مورفولوژیک را نشان میدهند. MDS عمدتا در افراد باالی 55 سال بروز میکنود و معموال خود را به شکل یک ک خونی مقاوم به مواد هماتینیک با یوا بودون وجوود نووتروپنی و ترومبوسویتوپنی نشوان میدهند. بعوی از ناهنجاریهای شایع سویتوژنتیکی در MDS کوه شوامل Del 5q,Del p53,del 7q,Del 20q بوه روش FISH مورد بررسی قرار میگیرد. نمونه مورد نیاز: 35 cc آسپیراسیون مغزاستخوان یا 5 cc خون محیطی هپارینه در اسرع وقت به آزمایشگاه و در دموای اتاق ارسال گردد. روش انجام آزمایش: پ از کشت در محیطهای کشت مخصو MDS سلولها وارد مرحله اینترفاز و متافاز میگردنود و توسط مراحل Pretreatment و سپ با استفاده از پروبهای هیبریدیزیشن که به صورت تجواری خریوداری مویشوود مرحله هیبریداسیون انجام و در نهایت طوی عملیوات Posthybridization نمونوههوا آمواده بررسوی توسوط میکروسوکوپ فلورسان میگردد. حساسیت روش مورد آزمایش: براساس کیفیت پروبها و سیگنالهای مشاهده شده برای بررسی اخوتالالت سواختاری وشمارشی کروموزومها حساسیت حدود 85 %میباشد. مدارک مورد نیاز: اطالعات بالینی و مدارک پزشکی بیمار و اطالع از آخرین دوره شیمی درمانی و نوع داروهای مصورفی و تشخیص اولیه موارد برگشت نمونه: نمونه یخ زده لخته نمونه همولیز یا وجود آلودگیهایی داخل نمونوه گورفتن نمونوه در لولوههوای مدت زمان الزم جهت پاسخگویی: 15 روز نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک بر اساس سویگنالهوای فلورسونت ایجواد شده بررسی تفسیر و گزارش میشود پذیرش کشت سلولهای مغز استخوان سایر مطالعات سیتوژنتیک FISH پروب برای تفسیر و گزارش

10 بررسی اختالالت کروموزومی در CLL به روش FISH FISH for CLL: Trisomy 12, del (6q),del(17p), del(13q), del(11q) شرح تست: لوسمی مزمن لنفوسیت )CLL( اختاللی است که به وسیله تکثیر منوکلونال لنفوسیتهایی با ظاهر بالغ کوه خصوصیات فنوتیپی مشخص دارند شناخته میشود. CLL یکی از فرمهای شایع لوسمی بزرگساالن است. بویش از %95 از بیماران مبتال به CLLیک یا چند مورد آسیب سیتوژنتیکی را با روش FISH نشان میدهند.ایون اخوتالالت کرومووزومی هریک پیش آگهی خاصی را پیش بینی میکنند و از این روش برای کمک به تشخیص تاییود یافتوههوای سویتوژنتیک و پیگیری و پاسخ به درمان میتوان استفاده کرد. نمونه مورد نیاز: 35 cc آسپیراسیون مغزاستخوان یا 5 cc خون محیطی هپارینه در اسرع وقت به آزمایشگاه و در دمای اتاق ارسال گردد. روش انجام آزمایش: پ از کشت در محیطهای کشت مخصو CLL سلولها وارد مرحله اینترفاز و متافاز میگردند و توسط مراحل Pretreatment و سپ با استفاده از پروبهای هیبریدیزیشن که بوه صوورت تجواری خریوداری مویشوود مرحله هیبریداسیون انجام و در نهایت طوی عملیوات Posthybridization نمونوههوا آمواده بررسوی توسوط میکروسوکوپ فلورسان میگردد. حساسیت روش مورد آزمایش: براساس کیفیت پروبها و سیگنالهای مشاهده شده برای بررسی اختالالت ساختاری و شمارشی کروموزومها حساسیت حدود 85 %میباشد. مدارک مورد نیاز: اطالعات بالینی و مدارک پزشکی بیمار و اطالع از آخرین دوره شیمی درمانی و نوع داروهای مصورفی و تشخیص اولیه موارد برگشت نمونه: نمونه یخ زده لخته نمونه همولیز یا وجود آلودگیهایی داخل نمونوه گورفتن نمونوه در لولوههوای مدت زمان الزم جهت پاسخگویی: 15 روز نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک بر اساس سویگنالهوای فلورسونت ایجواد شده بررسی تفسیر و گزارش میشود. پذیرش کشت سلولهای مغز استخوان سایر مطالعات سیتوژنتیک پروب برای FISH تفسیر و گزارش 95488

11 بررسی اختالالت شمارشی کروموزومهای Y و 31X و 31 و 13 به روش FISH FISH for Chromosome 13, 18, 21, X, Y in Prenatal Diagnosis شرح تست: شایعترین آنوپلوئیدیها در تشخیصهای قبل از زایمان تریزومی کرومووزومهوای و اخوتالالت گنوادی جنسی میباشد که حدود %65 کل اختالالت کروموزومی و حدود %9585 اختالالت کروموزومی که با تولد نوزاد زنوده هموراه است را شامل میگردد.یکی از راههای تشخیصی سریع و انتخابی به دنبال آمنیوسونتز جهوت بررسوی ایون اخوتالالت تکنیوک هیبریدیزاسیون درجای فلورسان (Flurescence in situ hybridization) FISH بوا اسوتفاده از پوروبهوای سوانترومریک یوا اختصاصی لوکوس میباشد.غربالگری آنوپلوئیدی بر روی آمنیوسیتهای غیور کشوت داده شوده بوا اسوتفاده از تکنیوک FISH میتواند در زمان کوتاهتری نسبت به کشت آمنیوسیتها و کاریوتایپینگ معمولی بر روی مایع آمنیوتیک نتیجه دهد. در تسوت سریع غربالگری تریزومی و اختالالت کروموزومهای جنسی به وسیله تکنیوک FISH بالفاصوله بعود از آمنیوسونتز مرحله Pretreatment انجام و سپ با استفاده از پروبهای مخصو متصل به ماده فلورسان مرحله اتصال صورت میپوذیرد و در نهایت توسط میکروسکوپ فلورسان سیگنالهای حاصله بررسی و نتایج گزارش میگردد.برای اطمینان از نتوایج حاصول معموال همراه با این تست غربالگری کشت و کاریوتایپ مایع آمنیوتیک نیز انجام میپذیرد زیرا با استفاده از تکنیک FISH بوه تنهایی حدود %7535 موارد از اختالالت سیتوژنتیک قابل شناسایی ممکن است مشخص نگردد. موارد استفاده از تست: در مادران بارداری که خطر وجود جنین با اختالالت کروموزومی در آنها وجود دارد. در مادران با سن باال و افزایش خطر سندرم داون در جنین براساس غربالگری مارکرهای سرمی در مادر یافتههای غیرطبیعی در سونوگرافی سپ نمونه مورد نیاز: حدود 20cc از مایع آمنیوتیک تحت شرایط استریل و بالفاصله دردمای اتاق به ایون آزمایشوگاه ارسوال گردد.مایع آمنیوتیک باید شفاف و زرد کمرنگ باشد بهتر است 5cc اولیه آسپیره مایع آمنیوتیک ابتدا دور ریخته شوود و 20cc آسپیره بعدی جمعآوری و ارسال گردد. روش انجام آزمایش: بالفاصله بعد از آمنیوسنتز مرحله Pretreatment انجام و سپ متصل به ماده فلورسان بررسی و نتایج گزارش میگردد با استفاده از پروبهوای مخصوو مرحله اتصال صورت میپذیرد و در نهایت توسط میکروسکوپ فلورسان سیگنالهوای حاصوله حساسیت روش مورد آزمایش: در صورت انجام صحی به صورت همزمان حساسیت و اختصاصیت حدود %155 را داراست. آزمایش در صورت انجام کشت و کاریوتایپینگ مایع آمنیوتیوک مدارک مورد نیاز: آخرین نتایج آزمایشگاهی )مارکرهای سرمی مادر( و سونوگرافیهای قبلی. موارد برگشت نمونه: مایع آمنیوتیک آغشته به خون حتی به مقدار ک آمینوتیک که بیش از 7 ساعت بعد از زمان نمونهگیری به آزمایشگاه برسد. و یا قهووه ای رنوگ موایع آمنیوتیوک کودر مایع نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک بر اساس سویگنالهوای فلورسونت ایجواد شده بررسی تفسیر و گزارش میشود. پذیرش سایر مطالعات سیتوژنتیک پروب برای هر FISH تفسیر و گزارش 95488

12 تست بررسی افزایش بیان ژن Her2/neu با روش هیبریدیزاسیون درجای فلورسانس (FISH) FISH study for HER2/neu in Breast Cancer شررح تسرت: ژن Her2/neu گیرنوده تیوروزین کینوازی را کود موینمایود کوه سویگنالهای فواکتور رشود را درگیور موینمایود.افوزایش بیوان ژن در حودود %75 از سورطانهای پسوتان هموراه مویباشود و پویش آگهوی بودتری را بوازگو مینماید همینین افزایش بیان این ژن با درجات شیوع متغییری در کارسینومهای معده پروستات ریه کولون و تخمدان نیز دیده شده است.داروی Herceptin در بیماران مبتال به سرطان پستان که افوزایش بیوان Her2/neu را داشوته باشوند بسیار موثر میباشد و از این رو استفاده از این داروی گران قیمت مبتنی بر افزایش بیان ژن Her2/neu میباشد. در روش متداول از تکنیک ایمونوهیستوشیمی بروی بافت تومورال جهت بررسی افزایش بیان ایون ژن اسوتفاده مویگوردد ولوی در مواردی که IHC به طور کامل قادر به پاسخگویی دقیق نمیباشد و به صورت +7 گزارش میگردد تسوت تاییودی توسوط تکنیک( FISH(Fluorescence In Situ Hybridization و بروی بافت پارافینه و یا بافت تازه انجام میپذیرد. نمونه مورد نیاز: صورت وجود ارسال بلوک پارافینه به همراه اسالیدهای پاتولوژی و ارسوال اسوالیدهای ایمونوهیستوشویمی بیموار در روش انجام آزمایش: بروی بلوک پارافینه ابتدا مراحل Pretreatment و سپ بوا اسوتفاده از پوروبهوای هیبریدیزیشون مخصو ژن Her2/neu که به صورت تجاری خریداری میشود مرحله هیبریداسویون انجوام و در نهایوت طوی عملیوات Posthybridization نمونهها آماده و در نهایت مقایسه آن با پروب ژن کنترل به صورت همزمان و مقایسه نسوبت آنهوا و تفسیر و گزارش آن توسط میکروسکوپ فلورسان انجام میگردد. حساسیت روش مورد آزمایش: با توجه به اینکه تکنیک FISH روش استاندارد و طالیی بورای بررسوی وضوعیت بیوان Her2/neu میباشد حساسیت و اختصاصیت آن در صورت انجام صحی آزمایش %155 میباشد. مدارک مورد نیاز: اطالعات بالینی و مدارک پزشکی بیمار و اطالع از آخرین دوره شیمی درمانی و نوع داروهای مصورفی و تشخیص اولیه موارد برگشت نمونه: در صورت وجود خونریزی و نکروز شدید در بافت ارسالی و در صورتیکه کمتر از %25 بافت ارسوالی تومورال باشد. مدت زمان الزم جهت پاسخگویی: 15 روز نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک بررسی تفسیر و گزارش میشود. پذیرش سایر مطالعات سیتوژنتیک پروب برای FISH تفسیر و گزارش بررسی اسالید پاتولوژی از نظر مکان مناسب جهت انجام تست FISH

13 تست بررسی افزایش بیان ژن Her2/neu با روش هیبریدیزاسیون درجای کروموژنیک (CISH) CISH study for HER2/neu in Breast Cancer شرح تست: ژن Her2/neu گیرنده تیروزین کینازی را کد مینماید که سویگنالهای فواکتور رشود را درگیور موینمایود. افزایش بیان ژن در حدود %75 از سرطانهای پستان همراه میباشد و پیش آگهوی بودتری را بوازگو موینمایود همینوین افزایش بیان این ژن با درجات شیوع متغییری در کارسینومهای معده پروستات ریه کولون و تخمودان نیوز دیوده شوده است.داروی Herceptin در بیماران مبتال به سرطان پستان کوه افوزایش بیوان Her2/neu را داشوته باشوند بسویار مووثر میباشد و از این رو استفاده از این داروی گران قیمت مبتنی بر افزایش بیان ژن Her2/neu میباشد. در روش متوداول از تکنیک ایمونوهیستوشیمی بروی بافت تومورال جهت بررسی افزایش بیان این ژن استفاده میگردد ولوی در موواردی کوه IHC به طور کامل قادر به پاسخگویی دقیق نمیباشد و به صورت +7 گزارش مویگوردد تسوت تاییودی توسوط تکنیوک ) Hybridization CISH(chromogenic In Situ و بروی بافت پارافینه و یا بافت تازه انجام میپذیرد. نمونه مورد نیاز: صورت وجود ارسال بلوک پارافینه به همراه اسالیدهای پاتولوژی و ارسوال اسوالیدهای ایمونوهیستوشویمی بیموار در روش انجام آزمایش: بروی بلوک پارافینه ابتدا مراحل Pretreatment و سوپ بوا اسوتفاده از پوروبهوای مخصوو ژن Her2/neu کووه بووه صووورت تجوواری خریووداری موویشووود مرحلووه هیبریداسوویون انجووام و در نهایووت طووی عملیووات Posthybridization نمونهها آماده و در نهایت مقایسه آن با پروب ژن کنترل به صورت همزمان و مقایسه نسوبت آنهوا و تفسیر و گزارش آن توسط میکروسکوپ نوری)ارجحیت نسبت به روش ) FISH انجام میگردد. حساسیت روش مورد آزمایش: با توجه به مطالعات اخیر مبنی بر ارزش ه اندازه تکنیکهای FISH,CISH در صورت انجام صحی آزمایش حساسیت و اختصاصیت حدود %155 در نظر گرفته میشود. مدارک مورد نیاز: اطالعات بالینی و مدارک پزشکی بیمار و اطالع از آخرین دوره شیمی درمانی و نوع داروهای مصورفی و تشخیص اولیه موارد برگشت نمونه: در صورت وجود خونریزی و نکروز شدید در بافت ارسالی و در صورتیکه کمتر از %25 بافت ارسوالی تومورال باشد. مدت زمان الزم جهت پاسخگویی: 15 روز نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک بررسی تفسیر و گزارش میشود. پذیرش سایر مطالعات سیتوژنتیک پروب برای CISH تفسیر و گزارش بررسی اسالید پاتولوژی از نظر مکان مناسب جهت انجام تست CISH 99373

14

15 پنل ALL به روش RTPCR ALL (Qualitative) Panel:Nested RTPCR t(4;11), t(12;21), t(1;19), t(9;22) شرح تست: این تست به بررسی کیفی پنل ترانسلوکاسیونهای مربو به لوکمی لنفوبالستیک حاد (ALL) میپردازد. اهمیت تست 1 جهت شناسایی در مراحل ابتدایی بیماری 7 جهت شناسایی حداقل باقیمانده بیماری 3 جهت پایش احتمال بازگشت بیماری در طول دوره درمان 4 جهت بررسی پیش آگهی بیماری و تصمی گیری جهت پیوند مغز استخوان نمونه مورد نیاز: 4cc خون وریدی آغشته به (EDTA درصورت وجود بالست در خوون محیطوی( ویوا بویش از 2cc نمونوه آسپیره مغزاستخوان همراه EDTA برای تشخیص فرد مبتال الزم است.روی نمونه اس بیمار و زموان جموعآوری نمونوه بایود نوشته شود در صورت نیاز به ارسال نمونه از شهرهای دیگر هماهنگی با آزمایشگاه الزامیست. حداکثر زمان ارسوال نمونوه توا 49 ساعت و با حفظ زنجیره سرما میباشد. روش انجام آزمایش: RNA از خون وریدی یا مغزاستخوان استخراج میشود RNA برای تولید cdna بوه روش رونویسوی معکوس مورد استفاده قرار میگیورد پرایمرهوای اختصاصوی بورای تکثیور ترانسلوکاسویونهوای (22;9)t, t(12;21),t(1;19) و( t(4;11 به روش Nested RTPCR )واکنش زنجیره ای پلیمراز( مورد استفاده قرار میگیرد. حساسیت روش مورد آزمایش: تست RTPCR برای تشخیص (22;9)t, t(12;21),t(1;19) و( t(4;11 بسویار حسواستور و دقیوقتور از روش متوداول سویتوژنتیک یوا FISH اسوت بورای اسوتفاده از حوداکثر حساسویت روش Nested RTPCR بوا حساسیت 4 15 در این مرکز به کارمی رود. نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک به صورت کیفی و براساس بانودهای مشواهده شده در External RTPCR و Nested RTPCR بررسی تفسیر و گزارش میشود. پذیرش RNA استخراج RTPCR تفسیر و گزارش

16 بررسی ترانسلوکاسیون (11;4)t به روش RTPCR ALL Panel: 1) Nested RTPCR t(4;11) MLLAF4 شرح تست: جابه جایی کروموزوم (11;4)t در %5 کودکان مبتال به ALL و غالبا در نوع BALL دیده میشوود ایون جابوه جایی در %25 از موارد در مرحله شیرخوارگی دیده میشود و بیماری بیشتر به عنوان لوسومی دوران شویرخوارگی شوناخته میشود احتمال بهبودی کامل در این بیماری دیده میشود ولی عود نسبت به دیگر انواع لوسمیهای لنفوبالسوتیک بیشوتر است و به عنوان یک لوکمی لنفوئید حاد با پروگنوز بد شناخته میشود.ژنهای درگیر در این نوع جا به جایی عبوارت انوداز ژن AF4 در ناحیه q21 کروموزوم 4 و ژن MLL بروی کروموزوم 11 در ناحیه. q23 اهمیت تست 1 جهت شناسایی در مراحل ابتدایی بیماری 7 جهت شناسایی حداقل باقیمانده بیماری 3 جهت پایش احتمال بازگشت بیماری در طول دوره درمان 4 جهت بررسی پیش آگهی بیماری و تصمی گیری جهت پیوند مغز استخوان نمونه مورد نیاز: 4cc خون وریدی آغشته به (EDTA درصورت وجود بالست در خوون محیطوی( ویوا بویش از 2cc نمونوه آسپیره مغزاستخوان همراه EDTA برای تشخیص فرد مبتال الزم است.روی نمونه اس بیمار و زموان جموعآوری نمونوه بایود نوشته شود در صورت نیاز به ارسال نمونه از شهرهای دیگر هماهنگی با آزمایشگاه الزامیست. حداکثر زمان ارسوال نمونوه توا 49 ساعت و با حفظ زنجیره سرما میباشد. روش انجام آزمایش: RNA از خون وریدی یا مغزاستخوان استخراج میشود RNA برای تولید cdna بوه روش رونویسوی معکوس مورد استفاده قرار میگیرد پرایمرهای اختصاصی برای تکثیر ترانسلوکاسویون (11;4)t بوه روش Nested RTPCR )واکنش زنجیره ای پلیمراز( مورد استفاده قرار میگیرد. حساسیت روش مورد آزمایش: تست RTPCR بورای تشوخیص( t(4;11 سیتوژنتیک یا FISH است برای استفاده از حداکثر حساسیت روش Nested RTPCR با حساسیت کارمی رود. بسویار حسواستور و دقیوقتور از روش متوداول 15 4 در این مرکوز بوه نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک به صورت کیفی و براساس بانودهای مشواهده شده در External RTPCR و Nested RTPCR بررسی تفسیر و گزارش میشود. پذیرش RNA استخراج RTPCR_ t(4;11) تفسیر و گزارش

17 بررسی ترانسلوکاسیون (19;1)t به روش RTPCR ALL Panel: 2) Nested RTPCR t(1;19)(q23; p13) E2APBX1 شرح تست: در لوسمی لنفوبالستیک حاد کودکان (ALL) ناهنجواری t(1;19)(q23;p13) E2APBX1 بوا منشوا سولولهای pre B در %6 موارد رخ میدهد این ناهنجاری در بزرگساالن نیز رخ میدهد اما فراوانی آن کمتر است. این ترانسلوکاسویون قویا وابسته به خصوصیات ایمنوفنوتیپی سلولهای preb است. داشتن این ناهنجاری نشان دهنده پروگنوز بد بیماری اسوت. این ناهنجاری ناشی از جا به جایی ژن E2A(TCF3) روی کروموزوم 18 با ژن PBX1 روی کروموزوم 1 است. اهمیت تست 1 جهت شناسایی در مراحل ابتدایی بیماریALL 7 جهت شناسایی حداقل باقیمانده بیماری 3 جهت پایش احتمال بازگشت بیماری در طول دوره درمان 4 جهت بررسی پیش آگهی بیماری نمونه مورد نیاز: 4cc خون وریدی آغشته به (EDTA درصورت وجود بالست در خوون محیطوی( ویوا بویش از 2cc نمونوه آسپیره مغزاستخوان همراه EDTA برای تشخیص فرد مبتال الزم است.روی نمونه اس بیمار و زموان جموعآوری نمونوه بایود نوشته شود در صورت نیاز به ارسال نمونه از شهرهای دیگر هماهنگی با آزمایشگاه الزامیست. حداکثر زمان ارسوال نمونوه توا 49 ساعت و با حفظ زنجیره سرما میباشد. روش انجام آزمایش: RNA از خون وریدی یا مغزاستخوان استخراج میشود RNA برای تولید cdna بوه روش رونویسوی معکوس مورد استفاده قرار میگیرد پرایمرهای اختصاصی برای تکثیور ترانسلوکاسویون t(1;19)(q23;p13) E2APBX1 بوه روش Nested RTPCR )واکنش زنجیره ای پلیمراز( مورد استفاده قرار میگیرد. حساسیت روش مورد آزمایش: تست RTPCR بورای تشوخیص.(19;1)t بسویار حسواستور و دقیوقتور از روش متوداول سیتوژنتیک یا FISH است. برای استفاده از حداکثر حساسیت روش Nested RTPCR با حساسیت کارمی رود در این مرکز بوه نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک به صورت کیفی و براساس بانودهای مشواهده شده در External RTPCR و Nested RTPCR بررسی تفسیر و گزارش میشود. پذیرش استخراج RNA RTPCR_ t(1;19) تفسیر و گزارش

18 بررسی ترانسلوکاسیون (21;12)t به روش RTPCR ALL Panel: 3) Nested RTPCR t(12;21)(p13;q22) TELAML1 or ETV6RUNX1 شرح تست: در لوسمی لنفوبالستیک حاد کودکوان (ALL( بوا منشوا سولولهای B و در %7575 مووارد رخ مویدهود. ایون ناهنجاری بیشتر در کودکان دیده میشود و با افزایش سن از میزان آن کاسته میشود داشتن این ناهنجواری نشوان دهنوده پروگنوز خوب بیماری است و بهبودی را در %9585 از موارد نشان موی دهو د ا یون ناهنجواری ناشوی از جوا بوه جوا یی ژن TEL(ETV6) روی کروموزوم 17 با ژن AML1(RUNX1) روی کروموزوم 71 است. اهمیت تست 1 جهت شناسایی در مراحل ابتدایی بیماری 7 جهت شناسایی حداقل باقیمانده بیماری 3 جهت پایش احتمال بازگشت بیماری در طول دوره درمان 4 جهت بررسی پیش آگهی بیماری و تصمی گیری جهت پیوند مغز استخوان نمونه مورد نیاز: 4cc خون وریدی آغشته به (EDTA درصورت وجود بالسوت در خوون محیطوی( ویوا 2cc نمونوه آسوپیره مغزاستخوان همراه EDTA برای تشخیص فرد مبتال الزم است.روی نمونه اس بیمار و زمان جموعآوری نمونوه بایود نوشوته شود. در صورت نیاز به ارسال نمونه از شهرهای دیگرهماهنگی با آزمایشگاه الزامیسوت. حوداکثر زموان ارسوال نمونوه توا 49 ساعت و با حفظ زنجیره سرما میباشد. روش انجام آزمایش: RNA از خون وریدی یا مغزاستخوان استخراج میشود RNA بورای تولیود cdna بوه روش رونویسوی معکووس مورد استفاده قرار میگیرد پرایمرهای اختصاصی برای تکثیر ترانسلوکاسویون t(12;21)(p13;q22) TELAML1 or ETV6RUNX1 به روش Nested RTPCR )واکنش زنجیره ای پلیمراز( مورد استفاده قرار میگیرد. حساسیت روش مورد آزمایش: تست RTPCR برای تشوخیص( t(12;21 سیتوژنتیک یا FISH است برای استفاده از حداکثر حساسیت روش Nested RTPCR با حساسیت کارمی رود. بسویار حسواستور و دقیوقتور از روش متوداول 4 15 در ایون مرکوز بوه نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک به صورت کیفی و براساس بانودهای مشواهده شده در External RTPCR و Nested RTPCR بررسی تفسیر و گزارش میشود. پذیرش استخراج RNA RT PCR t(12;21) تفسیر و گزارش

19 و( آزمایشگاه تخصصی و فوق تخصصی دکتر آیت الل هی بررسی ترانسلوکاسیون (22;9)t به روش RTPCR Nested, RTPCR t(9;22)(q34.1;q11.2)/bcrabl1 P210,P190, P230 شرح تست: t(9;22)(q34.1;q11.2)/bcrabl1 یکی از ترانسلوکاسیونهای وابسته به انواع ناهنجاریهوای خوونی اسوت. تقریبا %155 از بیماران مبتال به لوسمی میلوئیدمزمن (CML) این ترانسلوکاسیون را دارند در نتیجه جا به جایی ژن ABL روی کروموزوم 8 با ژن BCR روی کروموزوم 77 پروتئین p190)و(p210) برخی از بیماران مبتال به ALL بزرگساالن و گاها اطفال نیز گزارش شده است. (p230( به وجود میآید. ایون جوا بوه جوایی در اهمیت تست 1 جهت شناسایی در مراحل ابتدایی بیماری ALL CML 7 جهت شناسایی حداقل باقیمانده بیماری 3 جهت پایش احتمال بازگشت بیماری در طول دوره درمان 4 جهت بررسی پیش آگهی بیماری و تصمی گیری جهت پیوند مغز استخوان ساعت نمونه مورد نیاز: 4cc خون وریدی آغشته به EDTA )در صورت وجود بالست در خون محیطوی ) ویوا 2cc نمونوه آسوپیره مغزاستخوان همراه EDTA برای تشخیص فرد مبتال الزم است.روی نمونه اس بیمار و زمان جموعآوری نمونوه بایود نوشوته شود در صورت نیاز به ارسال نمونه از شهرهای دیگر هماهنگی با آزمایشوگاه الزامیسوت. حوداکثرزمان ارسوال نمونوه توا 49 وبا حفظ زنجیره سرما میباشد. روش انجام آزمایش: RNA از خون وریدی یا مغزاستخوان استخراج میشود RNA برای تولید cdna بوه روش رونویسوی معکوس مورد استفاده قرار میگیرد پرایمرهای اختصاصی برای تکثیر ترانسلوکاسیون t(9;22)(q34.1;q11.2)/bcrabl1 به روش Nested RTPCR )واکنش زنجیره ای پلیمراز( مورد استفاده قرار میگیرد. حساسیت روش مورد آزمایش: تسوت RTPCR بورای تشوخیص( t(9;22 سیتوژنتیک یا FISH است برای استفاده از حداکثر حساسیت روش Nested RTPCR با حساسیت مرکز به کارمی رود. بسویار حسواستور و دقیوقتور از روش متوداول 3 15 درایون 4 15 توا نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک به صورت کیفی و براساس بانودهای مشواهده شده در External RTPCR و Nested RTPCR بررسی تفسیر و گزارش میشود پذیرش استخراج RNA RTPCR _ t(9;22) P190 RTPCR _ t(9;22) P210 RTPCR _ t(9;22) P230 تفسیر و گزارش 95488

20 پنل ALL به روش Real time PCR ALL(Quantitative) Panel : Real TimePCR t(1;19),t(12;21),t(4;11),t(9;22) این تست به بررسی کمی پنل ترانسلوکاسیونهای لوکمی لنفوبالستیک حاد( ALL ) میپردازد. 1 جهت شناسایی در مراحل ابتدایی بیماری ALL شرح تست: اهمیت تست 7 جهت شناسایی حداقل باقیمانده بیماری 3 جهت پایش احتمال بازگشت بیماری در طول دوره درمان 4 جهت بررسی پیش آگهی بیماری و تصمی گیری جهت پیوند مغز استخوان نمونه مورد نیاز: 4cc خون وریدی آغشته به (EDTA درصورت وجود بالست در خوون محیطوی ) ویوا بویش از 2cc نمونوه آسپیره مغزاستخوان همراه EDTA برای تشخیص فرد مبتال الزم است.روی نمونه اس بیمار و زموان جموعآوری نمونوه بایود نوشته شود در صورت نیاز به ارسال نمونه از شهرهای دیگر هماهنگی با آزمایشگاه الزامیست. حداکثر زمان ارسوال نمونوه توا 49 ساعت و با حفظ زنجیره سرما میباشد. روش انجام آزمایش: RNA از خون وریدی یا مغزاستخوان استخراج میشود RNA برای تولید cdna بوه روش رونویسوی معکوس مورد استفاده قرار میگیرد با استفاده از پرایمرها و پروبهای مخصو RNA ژن موورد نظور و ژن کنتورل میوزان بیان با استفاده ازTimePCR Quantitative Real بررسی و این نسبت گزارش میگردد. حساسریت روش مرورد آزمرایش: تسوت Real TimePCR بورای تشوخیص( t(12;21),t(4;11),t(9;22 و (19;1)t حساستر و دقیقتر از روش متداول سیتوژنتیک یا بسویار 4 FISH است و با حساسیت 15 در این مرکز انجام میپذیرد. نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سویتوژنتیک بوه صوورت کموی و براسواس منحنویهوای Real time PCR بررسی تفسیر و گزارش میشود. پذیرش استخراج RNA Real TimePCR تفسیر و گزارش

21 بررسی ترانسلوکاسیون (11;4)t به روش Real time PCR ALL Panel : 2) Quantitative Real TimePCR t(4;11) MLLAF4 شرح تست: جابه جایی کروموزوم (11;4)t در %5 کودکان مبتال به ALL و غالبا در نوع BALL دیده میشود ایون جابوه جایی در %25 از موارد در مرحله شیرخوارگی دیده میشود و بیماری بیشتر به عنوان لوسمی دوران شویرخوارگی شوناخته میشود احتمال بهبودی کامل در این بیماری دیده میشود ولی عود نسبت به دیگر انواع لوسمیهای لنفوبالسوتیک بیشوتر است و به عنوان یک لوکمی لنفوئید حاد با پروگنوز بد شناخته میشود.ژنهای درگیر در این نوع جا به جایی عبارتند از ژن بروی کروموزوم 11 در ناحیه q23. MLL کروموزوم 4 وژن در ناحیه q21 AF4 Real Time PCR به معنی مشاهده لحظه به لحظوه فرآینود تکثیور در واکونش زنجیوره ای پلیموراز اسوت و بوه منظوور تشوخیص و 1 اندازهگیری کمیت توالیهای اختصاصی DNA و RNA انجام میپذیرد. در این سیست تشخیصی یک ماده فلورسنت در طی واکونش متناسب با میزان محصوالت هر سیکل آزاد میشود و میزان فلورسنت آن توسط یک نمایانگر )Detector( شناسایی و ثبت میگردد. اهمیت تست جهت شناسایی در مراحل ابتدایی بیماری 7 جهت شناسایی حداقل باقیمانده بیماری 3 جهت پایش احتمال بازگشت بیماری در طول دوره درمان 4 جهت بررسی پیش آگهی بیماری و تصمی گیری جهت پیوند مغز استخوان نمونه مورد نیاز: 4cc خون وریدی آغشته به (EDTA درصورت وجود بالست در خوون محیطوی( ویوا بویش از 2cc نمونوه آسپیره مغزاستخوان همراه EDTA برای تشخیص فرد مبتال الزم است.روی نمونه اس بیمار و زموان جموعآوری نمونوه بایود نوشته شود در صورت نیاز به ارسال نمونه از شهرهای دیگر هماهنگی با آزمایشگاه الزامیست. حداکثر زمان ارسوال نمونوه توا 49 ساعت و با حفظ زنجیره سرما میباشد. روش انجام آزمایش: RNA از خون وریدی یا مغزاستخوان استخراج میشود RNA معکوس مورد استفاده قرار میگیرد با استفاده از پرایمرها و پروبهای مخصو بیان با استفاده ازTimePCR Quantitative Real بررسی و این نسبت گزارش میگردد. برای تولید cdna بوه روش رونویسوی RNA ژن موورد نظور و ژن کنتورل میوزان حساسیت روش مورد آزمایش: تست Real TimePCR برای تشخیص (11;4)t بسیار حساستر و دقیقتر از روش متوداول سیتوژنتیک یا 4 FISH است و با حساسیت 15 در این مرکز انجام میپذیرد. نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکوولی و سویتوژنتیک بوه صوورت کموی و براسواس منحنویهوای Real timepcr بررسی تفسیر و گزارش میشود پذیرش استخراج RNA Real TimePCR t(4;11) تفسیر و گزارش

22 بررسی ترانسلوکاسیون (19;1)t به روش Real time PCR ALL Panel : 1) Quantitative Real TimePCR t(1;19)(q23;p13) E2APBX1 شرح تست: در لوسمی لنفوبالستیک حاد کودکان (ALL) ناهنجواریE2APBX1 t(1;19)(q23;:p13) بوا منشوا سولولهای preb در %6 موارد رخ میدهد این ناهنجاری در بزرگساالن نیز رخ میدهد اما فراوانی آن کمتر است این ترانسلوکاسویون قویا وابسته به خصوصیات ایمنوفنوتیپی سلولهای preb است. داشتن این ناهنجاری نشان دهنده پروگنوز بد بیماری اسوت. این ناهنجاری ناشی از جا به جایی ژن E2A(TCF3) روی کروموزوم 18 با ژن PBX1 روی کروموزوم 1 است. Real Time PCR به معنی مشاهده لحظه به لحظوه فرآینود تکثیور در واکونش زنجیوره ای پلیموراز اسوت و بوه منظوور تشوخیص و 1 اندازهگیری کمیت توالیهای اختصاصی DNA و RNA انجام میپذیرد. در این سیست تشخیصی یک ماده فلورسنت در طی واکونش متناسب با میزان محصوالت هر سیکل آزاد میشود و میزان فلورسنت آن توسط یک نمایانگر )Detector( شناسایی و ثبت میگردد. اهمیت تست جهت شناسایی در مراحل ابتدایی بیماری ALL 7 جهت شناسایی حداقل باقیمانده بیماری 3 جهت پایش احتمال بازگشت بیماری در طول دوره درمان 4 جهت بررسی پیش آگهی بیماری و تصمی گیری جهت پیوند مغز استخوان نمونه مورد نیاز: 4cc خون وریدی آغشته به (EDTA درصورت وجود بالست در خوون محیطوی ) ویوا بویش از 2cc نمونوه آسپیره مغزاستخوان همراه EDTA برای تشخیص فرد مبتال الزم است.روی نمونه اس بیمار و زموان جموعآوری نمونوه بایود نوشته شود در صورت نیاز به ارسال نمونه از شهرهای دیگر هماهنگی با آزمایشگاه الزامیست. حداکثر زمان ارسوال نمونوه توا 49 ساعت و با حفظ زنجیره سرما میباشد. روش انجام آزمایش: RNA از خون وریدی یا مغزاستخوان استخراج میشود RNA معکوس مورد استفاده قرار میگیرد با استفاده از پرایمرها و پروبهای مخصو بیان با استفاده ازTimePCR Quantitative Real بررسی و این نسبت گزارش میگردد. برای تولید cdna بوه روش رونویسوی RNA ژن موورد نظور و ژن کنتورل میوزان حساسیت روش مورد آزمایش: تست Real TimePCR برای تشخیص (19;1)t بسیار حساستر و دقیقتر از روش متوداول سیتوژنتیک یا FISH است و با حساسیت 4 15 در این مرکز انجام میپذیرد. نتیجر ه: نتیجو ه آزمو ایش توسو ط پزشو ک فلوشو یپ پو اتولوژی مولکو ولی و سو یتوژنتیک بو ه صو ورت منحنیهای Real time PCR بررسی تفسیر و گزارش میشود. کموی و براسواس پذیرش استخراج RNA Real TimePCR t(1;19) تفسیر و گزارش 95488

23 بررسی ترانسلوکاسیون (21;12)t به روش Real time PCR ALL Panel: 3) Quantitative Real TimePCR t(12;21)(p13;q22) TELAML1 or ETV6RUNX1 شرح تست: در لوسمی لنفوبالستیک حاد کودکان (ALL( بوا منشوا سولولهای B و در %7575 مووارد رخ مویدهود. ایون ناهنجاری بیشتر در کودکان دیده میشود و با افزایش سن از میزان آن کاسته میشود. داشتن این ناهنجاری نشوان دهنوده پروگنوز خوب بیماری است و بهبودی را در 9585 %از مووارد نشوان مویدهود. ایون ناهنجواری ناشوی از جوا بوه جوایی ژن TEL(ETV6) روی کروموزوم 17 با ژن AML1(RUNX1) روی کروموزوم 71 است. Real Time PCR به معنی مشاهده لحظه به لحظوه فرآینود تکثیور در واکونش زنجیوره ای پلیموراز اسوت و بوه منظوور تشوخیص و اندازهگیری کمیت توالیهای اختصاصی DNA و RNA انجام میپذیرد. در این سیست تشخیصی یک ماده فلورسنت در طی واکونش متناسب با میزان محصوالت هر سیکل آزاد میشود و میزان فلورسنت آن توسط یک نمایانگر )Detector) شناسایی و ثبت میگردد. اهمیت تست 1 جهت شناسایی در مراحل ابتدایی بیماری 7 جهت شناسایی حداقل باقیمانده بیماری 3 جهت پایش احتمال بازگشت بیماری در طول دوره درمان 4 جهت بررسی پیش آگهی بیماری و تصمی گیری جهت پیوند مغز استخوان نمونه مورد نیاز: 4cc خون وریدی آغشته به (EDTA درصورت وجود بالست در خوون محیطوی( ویوا بویش از 2cc نمونوه آسپیره مغزاستخوان همراه EDTA برای تشخیص فرد مبتال الزم است.روی نمونه اس بیمار و زموان جموعآوری نمونوه بایود نوشته شود. در صورت نیاز به ارسال نمونه از شهرهای دیگر هماهنگی با آزمایشگاه الزامیست. حداکثر زمان ارسال نمونوه توا 49 ساعت و با حفظ زنجیره سرما میباشد. روش انجام آزمایش: RNA از خون وریدی یا مغزاستخوان استخراج میشود RNA برای تولید cdna بوه روش رونویسوی معکوس مورد استفاده قرار میگیرد با استفاده از پرایمرها و پروبهای مخصو RNA ژن مورد نظور و ژن کنتورل میوزان بیان با استفاده ازTimePCR Quantitative Real بررسی و این نسبت گزارش میگردد. حساسیت روش مورد آزمایش: تست Real TimePCR بورای تشوخیص )21;12)t بسویار حسواستور و دقیوقتور از روش متداول سیتوژنتیک یا FISH است. و با حساسیت 4 15 در این مرکز انجام میپذیرد. نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکوولی و سویتوژنتیک بوه صوورت کموی و براسواس منحنویهوای Real time PCR بررسی تفسیر و گزارش میشود. پذیرش استخراج RNA Real timepcr t(12;21) تفسیر و گزارش

24 بررسی ترانسلوکاسیون (22;9)t به روش Real time PCR Quantitative Real TimePCR t(9;22)(q34.1;q11.2)/bcrabl1p230, P210, P190 شرح تست: t(9;22)(q34.1;q11.2)/bcrabl1 یکی از ترانسلوکاسیونهای وابسته به انواع ناهنجاریهوای خوونی اسوت. تقریبا %155 از بیماران مبتال به لوسمی میلوئیدمزمن (CML) این ترانسلوکاسیون را دارند در نتیجه جا به جایی ژن ABL روی کروموزوم 8 با ژن BCR روی کروموزوم 77 پروتئین (P210) و (P190( و )P230) به وجود میآید. این جا به جوایی در برخی از بیماران مبتال به ALL بزرگساالن و گاها اطفال نیز گزارش شده است. Real Time PCR به معنی مشاهده لحظوه به لحظه فرآیند تکثیر در واکنش زنجیره ای پلیمراز است و به منظور تشخیص و اندازهگیری کمیوت تووالیهوای اختصاصوی DNA و RNA انجام میپذیرد. در این سیست تشخیصی یک ماده فلورسنت در طی واکنش متناسب با میزان محصوالت هر سیکل آزاد میشود و میزان فلورسنت آن توسط یک نمایانگر )Detector( شناسایی و ثبت میگردد. اهمیت تست 1 جهت شناسایی در مراحل ابتدایی بیماری CML,ALL 7 جهت شناسایی حداقل باقیمانده بیماری 3 جهت پایش احتمال بازگشت بیماری در طول دوره درمان 4 جهت بررسی پیش آگهی بیماری و تصمی گیری جهت پیوند مغز استخوان نمونه مورد نیاز: 4cc خون وریدی آغشته به EDTA )در صورت وجود بالست در خون محیطوی ) ویوا بویش از 2cc نمونوه آسپیره مغزاستخوان همراه EDTA برای تشخیص فرد مبتال الزم است.روی نمونه اس بیمار و زموان جموعآوری نمونوه بایود نوشته شود. در صورت نیاز به ارسال نمونه از شهرهای دیگر هماهنگی با آزمایشگاه الزامیست. حداکثر زمان ارسال نمونوه توا 49 ساعت و با حفظ زنجیره سرما میباشد. روش انجام آزمایش: RNA از خون وریدی یا مغزاستخوان استخراج میشود RNA معکوس مورد استفاده قرار میگیرد با استفاده از پرایمرها و پروبهای مخصو بیان با استفاده ازTimePCR Quantitative Real بررسی و این نسبت گزارش میگردد. برای تولید cdna بوه روش رونویسوی RNA ژن موورد نظور و ژن کنتورل میوزان حساسیت روش مورد آزمایش: تست Real TimePCR برای تشخیص (22;9)t بسیار حساستر و دقیقتر از روش متوداول سیتوژنتیک یا 4 5 FISH است و با حساسیت 15 تا 15 در این مرکز انجام میپذیرد. نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکوولی و سویتوژنتیک بوه صوورت کموی و براسواس منحنویهوای Real time PCR بررسی تفسیر و گزارش میشود. پذیرش استخراج RNA Real timepcr t(9;22) تفسیر و گزارش

25 پنل AML به روش RTPCR AML (Qualitative) Panel: Nested RTPCR t(8;21), t(15;17), t(6;9), inv16, t(9;11) شرح تست: این تست به بررسی کیفی پنل ترانسلوکاسیونهای مربو به لوکمی میلوبالستیک حاد (AML) میپردازد. اهمیت تست 1 جهت شناسایی در مراحل ابتدایی بیماری 7 جهت شناسایی حداقل باقیمانده بیماری 3 جهت پایش احتمال بازگشت بیماری در طول دوره درمان 4 جهت بررسی پیش آگهی بیماری و تصمی گیری جهت پیوند مغز استخوان نمونه مورد نیاز: 4cc خون وریدی آغشته به (EDTA درصورت وجود بالست در خوون محیطوی( ویوا بویش از 2cc نمونوه آسپیره مغزاستخوان همراه EDTA برای تشخیص فرد مبتال الزم است.روی نمونه اس بیمار و زموان جموعآوری نمونوه بایود نوشته شود در صورت نیاز به ارسال نمونه از شهرهای دیگر هماهنگی با آزمایشگاه الزامیست. حداکثر زمان ارسوال نمونوه توا 49 ساعت و با حفظ زنجیره سرما میباشد. روش انجام آزمایش: RNA از خون وریدی یا مغزاستخوان استخراج میشود RNA برای تولید cdna بوه روش رونویسوی معکوس مورد استفاده قرار میگیرد پرایمرهای اختصاصی برای تکثیر ترانسلوکاسیونهای,(21;8)t,(17;15)t,(9;6)t inv16 به روش Nested RTPCR )واکنش زنجیره ای پلیمراز( مورد استفاده قرار میگیرد. حساسیت روش مورد آزمایش: تست RTPCR برای تشوخیص ترانسلوکاسویونهوای t(8;21), t(15;17), t(6;9), inv16 بسیار حساستر و دقیقتر از روش متداول سیتوژنتیک یا FISH است برای استفاده از حداکثر حساسیت روش Nested RT PCR با حساسیت 4 15 در این مرکز به کارمی رود. نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک به صورت کیفی و براساس بانودهای مشواهده شده در External RTPCR و Nested RTPCR بررسی تفسیر و گزارش میشود. پذیرش RNA استخراج RTPCR تفسیر و گزارش

26 بررسی ترانسلوکاسیون (21;8)t به روش RTPCR AML Panel: 1) Nested RTPCR t(8;21)(q22;q22) RUNX1RUNX1T1 شرح تست: لوسمی میلوئید حاد )AML( با t(8;21)(q22;q22) RUNX1RUNX1T1 به طور کلی نشان دهنوده بلوود در رده نوتروفیلی است.( t(8;21 در %5 از موارد AML و در %15 از موارد AMLM2 طبق تقسی بندی FAB دیده میشود. به طور غالب در افراد جوان رخ میرهدو در مراحل ابتدایی لوکمی حواد میلوئیودی دیوده مویشوود. AML بوا ایون ناهنجواری کروموزومی نشان دهنده پروگنوز خوب بیماری است و به درمان با شیمی درمانی پاسخ خووبی مویدهود و معمووال بهبوودی کامل حاصل میشود. ژنهایی که در این نوع جابجایی دچار تغییر میشوند عبارت است از: ژن ETO در ناحیهq22 کروموزوم 9 و ژن AML1 بروی کروموزوم 71 در ناحیه q22. نقا شکست در انتهای '5 ژن ETO وبین اگزونهوای 5 و 6 ژن AML1 واقع شدهاند. اهمیت تست 1 جهت شناسایی در مراحل ابتدایی بیماری 7 جهت شناسایی حداقل باقیمانده بیماری 3 جهت پایش احتمال بازگشت بیماری در طول دوره درمان 4 جهت بررسی پیش آگهی بیماری و تصمی گیری جهت پیوند مغز استخوان نمونه مورد نیاز: 4cc خون وریدی آغشته به (EDTA درصورت وجود بالسوت در خوون محیطوی( ویوا 2cc نمونوه آسوپیره مغزاستخوان همراه EDTA برای تشخیص فرد مبتال الزم است.روی نمونه اس بیمار و زمان جموعآوری نمونوه بایود نوشوته شود. در صورت نیاز به ارسال نمونه از شهرهای دیگر هماهنگی با آزمایشگاه الزامیست. حوداکثر زموان ارسوال نمونوه توا 49 ساعت و با حفظ زنجیره سرما میباشد. روش انجام آزمایش: RNA از خون وریدی یا مغزاستخوان استخراج میشود RNA برای تولید cdna بوه روش رونویسوی معکوس مورد استفاده قرار میگیورد پرایمرهوای اختصاصوی بورای تکثیور ترانسلوکاسویون (21;8)t AML1ETO بوه روش Nested RTPCR )واکنش زنجیره ای پلیمراز( مورد استفاده قرار میگیرد. حساسیت روش مورد آزمایش: تسوت RTPCR بورای تشوخیص (21;8)t بسویار حسواستور و دقیوقتور از روش متوداول سیتوژنتیک یا FISH است.برای استفاده از حداکثر حساسیت روش Nested RTPCR با حساسیت کارمی رود در این مرکز بوه نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک به صورت کیفی و براساس بانودهای مشواهده شده در External RTPCR و Nested RTPCR بررسی تفسیر و گزارش میشود پذیرش استخراج RNA RTPCR_ t(8;21) تفسیر و گزارش 95488

27 بررسی ترانسلوکاسیون inv16 به روش RTPCR AML Panel: 2) Nested RTPCR t(16;16)(p13.1;q22) CBFBMYH11 or inv(16)(p13;1q22) شرح تست: لوسمی میلوئیدی حواد بوا ترانسلوکاسویون inv(16)(p13;1q22) t(16;16)(p13.1;q22) CBFBMYH11 or معموال با تمایز گرانولوسیتیک و منوسیتیک classification) )M4FAB نشان داده میشود همینین مشخصا با حوور اجوزا ائوزینوفیلیک غیرنرمال در مغزاستخوان همراهی دارد. inv16 معموال در %59 از افراد مبتال به AML یافت میشود.معمووال در تموام سونین اموا بوه طوور غالوب در افوراد جووان رخ مویدهود.مطالعوات کلینیکوی نشوان دادنود کوه افوراد مبوتال بوه Acute Myelomonocytic Leukemia با inv16 یا (16;16)t در اغلب موارد بهبودی کامل را پ از درمان نشان مویدهنود. ژنهای درگیر در این واژگونی عبارت انوداز:ژن MYH11 در ناحیوه p13 و ژن CBFB در ناحیوه q22 بوروی کرومووزوم 16 فیوژن ژن تشکیل شده از ناحیه 5 ژن CBFB به ناحیه 3 ژن. MYH11 اهمیت تست 1 جهت شناسایی در مراحل ابتدایی بیماری 7 جهت شناسایی حداقل باقیمانده بیماری 3 جهت پایش احتمال بازگشت بیماری در طول دوره درمان 4 جهت بررسی پروگنوز بیماری و تصمی گیری برای پیوند مغزاستخوان نمونه مورد نیاز: 4cc خون وریدی آغشته به (EDTA درصورت وجود بالست در خوون محیطوی( ویوا بویش از 2cc نمونوه آسپیره مغزاستخوان همراه EDTA برای تشخیص فرد مبتال الزم است.روی نمونه اس بیمار و زموان جموعآوری نمونوه بایود نوشته شود در صورت نیاز به ارسال نمونه از شهرهای دیگر هماهنگی با آزمایشگاه الزامیست. حداکثر زمان ارسوال نمونوه توا 49 ساعت و با حفظ زنجیره سرما میباشد. روش انجام آزمایش: RNA از خون وریدی یا مغزاستخوان استخراج میشود RNA برای تولید cdna بوه روش رونویسوی معکوووس مووورد اسووتفاده قوورار موویگیوورد پرایمرهووای اختصاصووی بوورای تکثیوور ترانسلوکاسوویون CBFBMYH11 inv(16)(p13;1q22) به روشRTPCR Nested )واکنش زنجیره ای پلیمراز( مورد استفاده قرار میگیرد. حساسیت روش مورد آزمایش: تست RTPCR برای تشخیص (16;16)t یا inv(16) بسیار حساستور و دقیوقتور از روش متوداول سیتوژنتیک یا FISH است برای استفاده از حداکثر حساسیت روش Nested RTPCR با حساسیت 4 15 در این مرکز به کارمی رود. نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک به صورت کیفی و براساس بانودهای مشواهده شده در External RTPCR و Nested RTPCR بررسی تفسیر و گزارش میشود. پذیرش RNA استخراج RTPCR_ inv16 تفسیر و گزارش 95488

28 بررسی ترانسلوکاسیون (17;15)t به روش RTPCR AML Panel: 3) Nested RTPCR t(15;17)(q22;q21) PMLRARA شرح تست: لوسمی پرومیلوسیت حاد )APL( با t(15;17)(q22;q21) PMLRARA نوعی لوسمی حادمیلوئیدی بوا برتوری پرومیلوسیتهای غیرنرمال میباشد.دارای دوتیپ هایپرگرانوالر و هیپورانوالر )میکروگرانوالر( است.در APL درحودود %155 موارد این ناهنجاری رخ میدهد. APL در %59 از بیماران مبتال به AML رخ میدهد این بیماری میتواند در هر سنی رخ دهد اما بیشتر در بزرگساالن روی میدهد.ژنهای درگیر در این نوع جابه جایی عبارتنداز: ژن PML در ناحیه q22 کروموزوم 15 و ژن RARα بروی کروموزوم 12 در ناحیه q21. اهمیت تست 1 جهت شناسایی در مراحل ابتدایی بیماری APL 7 جهت شناسایی حداقل باقیمانده بیماری 3 جهت پایش احتمال بازگشت بیماری در طول دوره درمان 4 جهت بررسی پیش آگهی بیماری و تصمی گیری جهت پیوند مغز استخوان نمونه مورد نیاز: 4cc خون وریدی آغشته به (EDTA درصورت وجود بالسوت در خوون محیطوی( ویوا 2cc نمونوه آسوپیره مغزاستخوان همراه EDTA برای تشخیص فرد مبتال الزم است.روی نمونه اس بیمار و زمان جموعآوری نمونوه بایود نوشوته شود در صورت نیاز به ارسال نمونه از شهرهای دیگر هماهنگی با آزمایشگاه الزامیسوت. حوداکثر زموان ارسوال نمونوه توا 49 ساعت و با حفظ زنجیره سرما میباشد. روش انجام آزمایش: RNA از خون وریدی یا مغزاستخوان استخراج میشود RNA برای تولید cdna بوه روش رونویسوی معکوس مورد استفاده قرار میگیرد پرایمرهای اختصاصی برای تکثیر ترانسلوکاسیون t(15;17)(q22;q21) PMLRARA به روش Nested RTPCR )واکنش زنجیره ای پلیمراز( مورد استفاده قرار میگیرد. حساسیت روش مورد آزمایش: تست RTPCR برای تشوخیص( t(15;17 سیتوژنتیک یا FISH است برای استفاده از حداکثر حساسیت روش Nested RTPCR با حساسیت کارمی رود. بسویار حسواستور و دقیوقتور از روش متوداول 4 15 در این مرکوز بوه نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک به صورت کیفی و براساس بانودهای مشواهده شده در External RTPCR و Nested RTPCR بررسی تفسیر و گزارش میشود. پذیرش استخراج RNA RTPCR_ t(15;17) تفسیر و گزارش 95488

29 بررسی ترانسلوکاسیون (9;6)t به روش RTPCR AML Panel: 4) Nested RTPCR t(6;9) (P23;q34) DEKNUP214 شرح تست: لوسمی میلوئید حاد با (9;6)t یک AML با یا بدون نمای منوسیتیک است کوه در حودود %1 از موواردAML دیده میشود و اغلب همراهی با بازوفیلی و دی پالزی چند رده ای میباشد. در بزرگساالن تعداد WBC Count نسوبت بوه سایر تیپهای AML عموما پایینتر است این ترانسلوکاسیون در تمام انواع ساب تیپهای AML در طبقه بنودی FAB بوه جز لوکمی پرومیلوسیتیک حاد و لوکمی مگاکاریوبالستیک حاد دیده میشود همراهی این ترانسلوکاسویون بوا AMLM2 و M4 بیشترین است. در 1/3 از موارد اجسام ائور دیده میشود بالستها برای میلو پروکسویداز مثبوت مویباشود و هییگونوه جمعیت سلولی اگهی ضعیفی همراه میباشد. بال ستیک با نمای خا در این مورد وجود ندارد.لوکمی میلوئید حاد با این جابه جایی کروموزومی با پویش اهمیت تست 1 جهت شناسایی در مراحل ابتدایی بیماری 7 جهت شناسایی حداقل باقیمانده بیماری 3 جهت پایش احتمال بازگشت بیماری 4 جهت بررسی پیش آگهی بیماری و تصمی گیری جهت پیوند مغز استخوان نمونه مورد نیاز: 4cc خون وریدی آغشته به (EDTA درصورت وجود بالسوت در خوون محیطوی( ویوا 2cc نمونوه آسوپیره مغزاستخوان همراه EDTA برای تشخیص فرد مبتال الزم است.روی نمونه اس بیمار و زمان جموعآوری نمونوه بایود نوشوته شود. در صورت نیاز به ارسال نمونه از شهرهای دیگر هماهنگی با آزمایشگاه الزامیست. حوداکثر زموان ارسوال نمونوه توا 49 ساعت و با حفظ زنجیره سرما میباشد.. روش انجام آزمایش: RNA از خون وریدی یا مغزاستخوان استخراج میشود RNA برای تولید cdna بوه روش رونویسوی معکوس مورد استفاده قرار میگیرد پرایمرهای اختصاصی برای تکثیر ترانسلوکاسیون t(6;9)(p23;q34) DEKNUP214 به روش Nested )واکنش RT PCR زنجیره ای پلیمراز( مورد استفاده قرار میگیرد. حساسیت روش مورد آزمرایش: تسوت RTPCR بورای تشوخیص (9;6)t بسویار حسواستور و دقیوقتور از روش متوداول سیتوژنتیک یا FISH است.برای استفاده از حداکثر حساسیت روش Nested RTPCR با حساسیت کارمی رود در این مرکوز بوه نتیجه: نتیجه آزمایش توسط پزشک فلوشیپ پاتولوژی مولکولی و سیتوژنتیک به صورت کیفی و براساس بانودهای مشواهده شده در External RTPCR و Nested RTPCR بررسی تفسیر و گزارش میشود. پذیرش RNA استخراج RTPCR_ t(6;9) تفسیر و گزارش